在我國(guó)鋅缺乏現(xiàn)象相當(dāng)普遍。血清鋅濃度測(cè)定是當(dāng)前*的鋅缺乏診斷試驗(yàn)。如果能夠排除感染、發(fā)燒、創(chuàng)傷等應(yīng)激反應(yīng),血清鋅測(cè)定值可以反映體內(nèi)鋅總體水平。但這種方法用血量較多,兒童及其家長(zhǎng)不愿接受。頭發(fā)鋅含量測(cè)定曾作為診斷鋅缺乏的常用方法。頭發(fā)樣品的采集、運(yùn)送、貯存、檢測(cè)都較方便,易為兒童及其家長(zhǎng)所接受。但洪昭毅等曾同時(shí)測(cè)定467例小兒血清和頭發(fā)鋅含量,結(jié)果顯示二者無相關(guān)性。頭發(fā)鋅含量測(cè)定只能作為群體營(yíng)養(yǎng)狀況及環(huán)境污染的監(jiān)測(cè)指標(biāo),不能作為鋅缺乏的診斷指標(biāo)。近年來,有學(xué)者相繼探索微量、簡(jiǎn)易、快捷、靈敏、可靠的鋅缺乏診斷方法。本室將有關(guān)報(bào)道加以綜合、改進(jìn),建立了高靈敏微量進(jìn)樣火焰原子吸收法測(cè)定微量全血鋅的方法,并應(yīng)用該方法進(jìn)行中國(guó)公共衛(wèi)生專項(xiàng)調(diào)查,以期制訂正常參考值。現(xiàn)報(bào)告如下。
1 對(duì)象與方法
1.1 對(duì)象 江西醫(yī)學(xué)院護(hù)理系一年級(jí)120名女生,平均年齡18.6 歲,zui小年齡17歲（16人） ,zui大年齡21歲（2 人） 。采血時(shí)皆無感染發(fā)燒等急性病表現(xiàn),亦無嚴(yán)重慢性疾病。
1.2 方法
1.2.1 靜脈血采集 于早晨空腹時(shí)采集,血樣離心分離血清,置冰箱備測(cè)。
1.2.2 全血樣采集 于采靜脈血的同時(shí),用一次性毛細(xì)管取同一人指端未稍血20μl注入盛有1ml稀釋液的聚乙烯塑料管中,并將附于毛細(xì)管壁的血洗凈,加蓋封緊置冰箱備測(cè)。
1.2.3 稀釋液及標(biāo)準(zhǔn)液配制 配制0.1 %TritonX-100水溶液,用于稀釋血樣,并起增敏和抗干擾作用。用純ZnO配制濃度為1000mg/L的Zn標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（含0.1mol/ LHNO3） ,放于冰箱備用。測(cè)試前用0.05 %TritonX-100 逐級(jí)稀釋配制標(biāo)準(zhǔn)工作液。
1.2.4 儀器測(cè)定條件 （1） 血清鋅測(cè)定:所用儀器為原子吸收分光光度計(jì), 采用火焰法。波長(zhǎng)213.8 nm ,燈電流7mA ,狹縫1nm ,燃燒器高度7mm ,空氣流量6.0L/ min ,乙炔流量1.0L/ min。（2） 微量全血鋅測(cè)定:設(shè)備條件同上。
1.2.5 測(cè)定方法 （1） 血清鋅測(cè)定:取靜脈血離心分離血清。取血清1ml加0.1mol/ L HNO34 ml混勻。將儀器按1.2.4 （1）所述條件設(shè)定調(diào)試好。用重蒸餾水調(diào)零。將空白液及系列標(biāo)準(zhǔn)液依次噴入火焰,記錄吸光度,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再將樣品噴入火焰,記錄吸光度,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得待測(cè)樣品的濃度。
（2） 微量全血鋅測(cè)定:向盛有全血的聚乙烯管中加入測(cè)試稀釋液1 ml ,搖勻上機(jī)測(cè)試。即按選定的儀器測(cè)定參數(shù),分別將標(biāo)準(zhǔn)溶液和試樣溶液直接噴霧測(cè)定吸光度。標(biāo)準(zhǔn)溶液（標(biāo)準(zhǔn)工作液系列） 濃度為:0 ,50 ,100 ,150 ,200μg/ L 。曲線繪制及結(jié)果計(jì)算由儀器配套計(jì)算機(jī)自動(dòng)完成。
1.2.6 確定正常參考值的方法 在比較均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差法與百分位數(shù)法的基礎(chǔ)上,從診斷實(shí)際出發(fā)制訂正常參考值。
2 結(jié) 果
2.1 血清鋅及全血鋅測(cè)量值 樣本量為120例。血清鋅均數(shù)為11.9μmol/ L ,標(biāo)準(zhǔn)差為3.49 ,中位數(shù)為11.50 。全血鋅均數(shù)為66.54μmol/ L ,標(biāo)準(zhǔn)差為8.52 ,中位數(shù)為67.60μmol/L 。第5 百分位血清鋅值為7.36μmol/ L , 30 百分位數(shù)為9.50 ; 40 百分位數(shù)為10.42 ; 5 百分位全血鋅值為50.48μmol/ L ,30 百分位數(shù)為62.48 ;40 百分位為64.94 。
2.2 分布檢驗(yàn) 血清鋅測(cè)量值呈正偏態(tài)尖峭峰分布。全血鋅測(cè)量值呈負(fù)偏態(tài)尖峭峰分布。
2.3 火焰原子吸收光譜法測(cè)定微量全血鋅的靈敏度與特異度 以火焰原子吸收光譜法所得血清鋅測(cè)定值作為“金標(biāo)準(zhǔn)”,即血清鋅測(cè)定法判斷為陽性者屬于真陽性（病人） 評(píng)價(jià)火焰原子吸收光譜法測(cè)定微量全血鋅（簡(jiǎn)稱微量全血鋅測(cè)定法）的靈敏度與特異度。當(dāng)血清鋅測(cè)定法陽性（鋅缺乏） 判斷標(biāo)準(zhǔn)為9.50μmol/ L ,微量全血鋅測(cè)定法陽性（鋅缺乏）判斷標(biāo)準(zhǔn)為62.50μmol/L時(shí), 后者的靈敏度為82.05% ,特異度為87.65 %。當(dāng)血清鋅測(cè)定法陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)為10.10μmol/ L ,微量全血鋅測(cè)定法陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)為64.30μmol/ L時(shí),后者的靈敏度為92.50 % , 特異度為87.5 % , 假陰性率（漏診率） 僅7.5 % ,假陽性率（誤診率） 僅12.5%。當(dāng)血清鋅測(cè)定法陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)為10.42μmol/ L ,微量全血鋅測(cè)定法陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)為64.94μmol/ L時(shí),后者的靈敏度降為87.8 % ,特異度降為86.07 %。
3 討 論
正常參考值的常用表示方法是均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差法。應(yīng)用該表示方法的前提是,諸測(cè)量數(shù)據(jù)的頻數(shù)分布呈正態(tài)。如前所述,微量全血鋅測(cè)定法諸測(cè)量數(shù)據(jù)呈偏態(tài)分布。此外,應(yīng)用這種表示方法都假定患病率為5 % ,這與實(shí)際情況不符。正常參考值的另一常用表示方法是百分位數(shù)法。這種表示方法同樣假定鋅缺乏患病率為5 %。我們應(yīng)用這一標(biāo)準(zhǔn)在人群中進(jìn)行鋅缺乏篩選,其結(jié)果與臨床表現(xiàn)的符合率很低。所以這兩種方法均不適用于制訂全血鋅的正常參考值。
根據(jù)文獻(xiàn)資料和實(shí)驗(yàn),取第30百分位數(shù)血清鋅測(cè)量值作為陽性分界值即“金標(biāo)準(zhǔn)”,評(píng)價(jià)第30 百分位數(shù)微量全血鋅測(cè)量值（待評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)） 的靈敏度和特異度。結(jié)果顯示,靈敏度為82.05 % , 特異度為87.65 %。將待評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)改為64.30μmol/ L , 則靈敏度提高至92.50 %（ 漏診率僅為7.50 %） ,特異度（ 87.50 %）仍處于較高水平, 誤診率僅12.5 %。若將待評(píng)價(jià)指標(biāo)改為第40 百分位數(shù)測(cè)量值64.94μmol/L ,則靈敏度降至87.80 % ,特異度降至86.07 %。所以,火焰原子吸收光譜法測(cè)定微量全血鋅其正常參考值下限應(yīng)訂為64.30μmol/ L 。
參考文獻(xiàn)
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